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Los anticuerpos multiespecíficos tienen especificidades de unión para al menos dos antígenos diferentes. Los métodos para preparar anticuerpos biespecíficos se conocen en la técnica.

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La purificación de la molécula correcta, que habitualmente se realiza mediante etapas de cromatografía de afinidad, es bastante engorrosa, y los rendimientos del producto son bajos. Preferiblemente, la fusión es con un dominio constante de la cadena pesada de la inmunoglobulina, que comprende al menos parte de badanie pap prostata regiones bisagra, CH2 y CH3.

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Se prefiere tener la primera región constante de la cadena pesada CH1 que contiene el sitio necesario para la unión a badanie pap prostata cadena ligera, presente en al menos una de las fusiones.

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En una realización preferida de este enfoque, los anticuerpos biespecíficos se componen de una cadena pesada de la inmunoglobulina híbrida con badanie pap prostata primera especificidad de unión en un brazo, y un par de cadena pesada-cadena ligera de la inmunoglobulina híbrida que proporciona una segunda especificidad de unión en el badanie pap prostata brazo.

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Los anticuerpos biespecíficos incluyen anticuerpos reticulados o "heteroconjugados". Por ejemplo, uno de los anticuerpos en el heteroconjugado puede acoplarse a avidina, el otro a biotina.

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Esto anticuerpos, por ejemplo, se han propuesto para seleccionar como diana células del sistema inmunitario con respecto a células no deseadas patente estadounidense n. Los anticuerpos heteroconjugados pueden prepararse usando cualquier método de badanie pap prostata conveniente.

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Los agentes reticulantes adecuados son bien conocidos en la técnica, y se describen en la patente estadounidense n. Las técnicas para generar anticuerpos badanie pap prostata a partir de fragmentos de anticuerpos también se han descrito en la bibliografía.

Por ejemplo, pueden prepararse anticuerpos biespecíficos usando enlace químico.

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Brennan et al. Estos fragmentos se reducen en presencia del agente complejante de ditioles arsenito de sodio, para estabilizar los ditioles vecinales y prevenir la formación de disulfuro intermolecular.

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Los anticuerpos biespecíficos producidos pueden usarse como agentes para la badanie pap prostata selectiva de enzimas. También se han descrito diversas técnicas para preparar y aislar fragmentos de anticuerpos biespecíficos directamente del cultivo de células recombinantes. Por ejemplo, se han producido anticuerpos biespecíficos usando cremalleras de leucina.

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Kostelny et al. Los péptidos de las cremalleras de leucina de las proteínas Fos y Jun se ligaron a las porciones Fab' de dos anticuerpos diferentes mediante fusión génica.

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Los homodímeros del anticuerpo se redujeron en la región bisagra para formar los monómeros, y luego se oxidaron nuevamente para formar los heterodímeros del anticuerpo. Badanie pap prostata método también puede utilizarse para la producción de los homodímeros del anticuerpo.

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También se ha informado de otra estrategia para preparar fragmentos de anticuerpos biespecíficos mediante el uso de dímeros de Fv de cadena sencilla sFv. Véase Gruber et al.

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Por ejemplo, pueden prepararse anticuerpos triespecíficos. Tutt et al. Por badanie pap prostata, el los residuo s de cisteína pueden introducirse en la región Fc, permitiendo de ese modo la formación de enlaces disulfuro entre las cadenas en esta región.

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Véase Caron et al. Los anticuerpos homodiméricos con actividad antitumoral potenciada también pueden prepararse usando agentes de reticulación heterobifuncionales tal como badanie pap prostata describe en Wolff et al. Alternativamente, puede modificarse badanie pap prostata ingeniería un anticuerpo, que tiene regiones Fc duales y de ese modo puede tener capacidades de ADCC y lisis por complemento potenciadas.

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Véase Steveson et al. La variante de anticuerpo en el presente documento se conjuga opcionalmente con un agente citotóxico.

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La maitansina, por ejemplo, puede convertirse en May-SS-Me que badanie pap prostata reducirse para dar May-SH3 y hacerse reaccionar con la variante de anticuerpo modificado Chari et al. Cancer Research para generar un conjugado maitansinoide-variante de anticuerpo.

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Por ejemplo, una inmunotoxina de ricina puede prepararse tal como se describe en Vitetta et al. Science Cancer Research badanie pap prostata Alternativamente, puede usarse una proteína de fusión que comprende la variante de anticuerpo y el agente citotóxico, por ejemplo, mediante técnicas recombinantes o síntesis de péptidos.

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Los conjugados de variante de anticuerpo-abzima pueden prepararse tal como se describe en el presente documento para el suministro de la abzima a una badanie pap prostata de células tumorales. Las enzimas de esta invención pueden unirse covalentemente a la variante badanie pap prostata anticuerpo mediante técnicas bien conocidas en la técnica tal como el uso de los reactivos de reticulación heterobifuncionales discutidos anterior- mente.

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Alternativamente, las proteínas de fusión que comprenden al menos la badanie pap prostata de unión a antígeno de una variante de anticuerpo de la badanie pap prostata ligada al menos a una porción funcionalmente activa de una enzima de la invención, pueden construirse usando técnicas de ADN recombinante bien conocidas en la técnica véase, por ejemplo, Neuberger et al. Nature, Otras modificaciones de la variante de anticuerpo se contemplan en el presente documento.

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Por ejemplo, la variante de anticuerpo puede ligarse a uno de una variedad de badanie pap prostata no proteínicos, por ejemplo, polietilenglicol PEGpolipropilenglicol, polioxialquilenos, o copolímeros de polietilenglicol y polipropilenglicol. Las variantes de anticuerpos descritas en el presente documento también pueden formularse como liposomas.

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Ligada a N se refiere a la unión del resto de hidrato de carbono a la cadena lateral de un residuo de asparagina. Por tanto, la badanie pap prostata de cualquiera de estas secuencias tripeptídicas en un polipéptido crea un sitio de glicosilación potencial. Cuando el badanie pap prostata comprende una región Fc, el hidrato de carbono unido al mismo puede alterarse.

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Por ejemplo, los anticuerpos con una estructura de hidrato de badanie pap prostata madura que carece de fucosa unida a una región Fc del anticuerpo se describen en la solicitud de patente estadounidense n. Las formulaciones que van a usarse para la administración in vivo deben ser estériles. Pueden prepararse preparaciones de liberación sostenida.

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Por ejemplo, la variante badanie pap prostata anticuerpo puede conjugarse con biotina y cualquiera de las tres amplias categorías de marcadores mencionadas anteriormente pueden conjugarse con avidina, o viceversa.

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La biotina se une selectivamente a badanie pap prostata avidina y por tanto, el marcador puede conjugarse con la variante de anticuerpo de esta manera indirecta. Alternativamente, para conseguir la conjugación indirecta del marcador con la variante de anticuerpo, la variante de anticuerpo se conjuga con un hapteno pequeño por ejemplo, digoxinabadanie pap prostata uno de los diferentes tipos de marcadores mencionados anteriormente se conjuga con una variante de anticuerpo anti-hapteno por ejemplo, anticuerpo anti-digoxina.

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